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    當前位置:首頁產品中心PCR&q-PCRPCRAN11L818/AN11L8192 x Taq PCR Master Mix

    2 x Taq PCR Master Mix

    產品簡介

    2 x Taq PCR Master Mix含有 Loading Dye,PCR 產物需經過切膠回收后才可充分去除 Loading Dye。

    產品型號:AN11L818/AN11L819
    更新時間:2025-06-11
    廠商性質:生產廠家
    訪問量:3671
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    品牌其他品牌貨號AN11L818/AN11L819
    規格2 * 1mL供貨周期現貨
    主要用途主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA 反轉錄后 cDNA 靶序列的定性檢測。應用領域生物產業

    2 x Taq PCR Master Mix

    產品描述

    2 x Taq PCR Master Mix 是PCR 反應預混液,其中包含Taq DNA Polymerase、dNTPs、反應緩沖液、loading Dye 等成分,使用時只需取適量本產品,加入模板和引物,并加入 ddH2O 補足體積,使反應體系濃度為 1× 即可進行 PCR 反應。本產品最長可擴增 5kb DNA片段,具有良好的擴增特異性和模板兼容性, PCR 產物 3' 端帶突出 A 堿基,純化后可直接用于 T/A 克隆。

    本產品中包含兩種染料,PCR反應完成后無需額外添加 loading buffer,可以直接進行電泳,且電泳過程中會出現兩個指示條帶。該染料不影響 PCR 擴增效率,但對于需要對 PCR 產物進行吸光度、熒光等光學分析的實驗,建議在分析前對 PCR 產物進行純化,或使用無染料的PCR預混液。


    訂購信息

    產品名稱

    貨號

    規格

    2 x  Taq PCR Master Mix

    AN11L818

    2*1mL

    2 x  Taq PCR Master Mix

    AN11L819

    5*1mL


    運輸與保存

    藍冰運輸。-20℃保存,有效期24個月。


    使用方法

    1.       常規 PCR 反應體系

    組分

    20 μL體系

    50 μL體系

    終濃度

    2 x  Taq PCR Master Mix

    10 μL

    25 μL

    1 x

    正向引物(10 μM)(1)

    0.4-0.8 μL

    1-2 μL

    0.2-0.4 μM

    反向引物(10 μM)(1)

    0.4-0.8 μL

    1-2 μL

    0.2-0.4 μM

    DNA 模板(2)

    X μL

    X μL

    -

    ddH2O

    To 20 μL

    To 50 μL

    -

    (1)       引物推薦終濃度為 0.2~0.4 μM,效果不佳時可以在 0.1~1 μM 濃度范圍內進行調整;  

    (2)       不同模板最佳反應濃度有所不同,以 50 μL 體系為例:模板為基因組 DNA 時,一般推薦的使用量為 10~400 ng;當模板為質?;虿《?DNA 時,一般推薦的使用量為 10 pg~20 ng。

    2.       常規 PCR 反應程序

    步驟

    溫度

    時間

    預變性(1)

    95℃

    3~5 min

    變性

    95℃

    30 sec

    退火

    53~65℃

    30 sec

    延伸(2)

    72℃

    30~60 sec/kb

     

    30~35 Cycles

    終延伸

    72℃

    5min







    (1)       該預變性條件適合絕大多數擴增反應, 對于一些復雜模板, 例如:菌液、菌落(尤其是酵母)的PCR 擴增,預變性時間可適當延長至 10 min,以提高預變性效果;

    (2)       關于延伸速率,當目的片段長度不超過 3 kb 時,推薦使用 30 sec/ kb;當目的片段長度大于 3 kb 時,推薦使用 60 sec/kb。

     

    3.       凝膠濃度對應的染料遷移距離

    瓊脂糖凝膠濃度

    金色條帶

    藍色條帶

    0.8%

    ~80 bp

    4000 bp

    1.0%

    ~40 bp

    2000 bp

    1.5%

    ~20 bp

    1500 bp

    2.0%

    <10 bp

    1200 bp

    2.5%

    <10 bp

    1200 bp

    3.0%

    <10 bp

    1200 bp

    注:染料會影響吸光度。

     

    注意事項

    1.   本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

    2.    本產品在短期 -20℃ 儲存時不會凝固,可以隨取隨用,如遇儲存溫度波動,體系結冰為正?,F象不影響使用。

    3.   建議將所有的反應組分在冰上配制,最后加入2 x  Taq PCR Master Mix。

    4.  使用基因組模板進行較長片段擴增需要使用高質量純化的DNA模板,可以提高 PCR 成功率。

    5.  本產品擴增產物可用于 T/A 克隆。由于本產品含有 Loading Dye,PCR 產物需經過切膠回收后才可充分去除 Loading Dye。

     

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